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完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢?

更新時間:2019-10-26      瀏覽次數:839
   完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢?
  在人ELISA試劑盒實驗中,只需遵從它應有的規矩才干更好的完成實驗,對此,為您分析了保證實驗效果的幾大基礎:
  1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都康復到室溫,以使效果更安穩。
  2.實驗時,要使底物避光保存。
  3.用槍羅致液體時速度不能太快,避免發作氣泡而使羅致量不。
  4.羅致液體時,要用量程和需要量靠近的槍去吸,削減過失。
  5.要保證移液槍的性,過失不能超過2%。可用水和電子天平進行確認。但有專。人員進行糾正。
  6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。羅致不同的液體后,要更換槍頭。即使是羅致標準品時。
  ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等
  完好的人ELISA試劑盒包含以下各組分:
  1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
  2.酶符號的抗原或抗體(結合物);
  3.酶的底物;
  4.陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考規范品和控制血清(定量測定中);
  5.結合物及標本的稀釋液;
  6.洗刷液
  7.酶反響停止液。
  人ELISA試劑盒操作過程:
  1. 加規范品:在酶標包被板上設規范品孔,依次參加不同濃度的規范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
  2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
  5. 洗刷:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  6. 加酶:除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗刷:操作同5。
  9. 顯色:ELISA試劑盒每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍色立轉黃色)。
  11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內進行。
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